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表达sFat-1基因慢病毒载体的构建及病毒生产
朱贵明1,2, 陈 宏1,3, 高 强2
1.西北农林科技大学 动物科技学院;2.军事医学科学院 生物工程研究所;3.徐州师范大学 细胞与分子生物学研究所
摘要:
为了建立有效地用于转基因动物生产的慢病毒表达系统,以线虫C.briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因(sFat-1)为目的基因构建了慢病毒表达载体,通过与慢病毒包装载体PLP1、PLP2和PLP/VSVG一起共转染293FT细胞系生产了慢病毒颗粒,并对其感染哺乳动物细胞NIH3T3细胞系的能力进行了检测。结果表明,该系统所生产的病毒滴度约为5.0×106 TU/mL,这种病毒能够感染哺乳动物细胞,说明构建的慢病毒表达系统是有效的,应用其可以生产感染力良好的慢病毒颗粒,并高效地进行sFat-1基因转移。
关键词:  慢病毒载体  转基因  基因表达  ω-3脂肪酸去饱和酶基因
DOI:
分类号:
基金项目:国家“863”计划项目(2006AA10Z197);西北农林科技大学拔尖人才支持计划项目
Construction of a lentiviral bector gor sFat-1 gene expression and production of lentivirals
Abstract:
In this research,a lentiviral vector system was constructed for the expression of sFat-1,a gene from C.briggsae encoding ω-3 fatty acid desaturase.By co-transfection of plasmids PLP1,PLP2,and PLP/VSVG with this vector,lentiviral particle produced 293FT cells,and the infection capacity of the lentiviral particle was tested by NIH3T3 cell line.Results demonstrated that this lentiviral expression system was successfully established,and it could be used to produce lentiviral particle with high efficient infection capacity for sFat-1 gene delivery.
Key words:  lentiviral vectors  transgene  gene expression  ω-3 fatty acid desaturase gene