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苹果脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)基因cDNA片段的克隆及序列分析
张燕子1, 马锋旺1, 张军科1
西北农林科技大学 园艺学院
摘要:
以皇家嘎拉苹果叶片为材料提取总RNA,合成cDNA第一链后,先利用巢式PCR获得苹果脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)基因中间片段,再利用3′-RACE方法进一步获得3′末端核酸序列,共得到840 bp包含完整3′末端的DHAR基因cDNA片段,其序列与烟草、水稻、番茄中DHAR基因序列的同源性均大于70%,证明所克隆到的核苷酸片段确为苹果DHAR基因cDNA片段。
关键词:  苹果  脱氢抗坏血酸还原酶  克隆  3′-RACE  序列分析
DOI:
分类号:
基金项目:西北农林科技大学“拔尖人才支持计划”项目;教育部优秀青年教师资助计划项目(2097)
Cloning and sequence analysis of cDNA segment encoding dehydroascorbate reductase from malus
Abstract:
In this study,a cDNA fragment of dehydroascorbate reductase (DHAR) including whole 3'-end was cloned from Royal Gala by RT-(nest) PCR and 3′-RACE.As deduced from the 840 bp cDNA nucleotide,it presented more than 70% homologous traits with tobacco DHAR,Rice DHAR and tomato DHAR,These results suggest that the cDNA fragment is from DHAR gene of Royal Gala.
Key words:  malus  dehydroascorbate reductase (DHAR)  cloning  3′-RACE  sequence analysis