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猪瘟病毒E2蛋白A/D抗原域在毕赤酵母中的表达
徐学清1, 曹瑞兵1, 蔡梅红1
南京农业大学 农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室
摘要:
对含猪瘟病毒E2蛋白A/D抗原区基因插入的重组酵母菌株进行诱导表达,通过对诱导时间、重组酵母菌株、菌体密度、培养液pH、甲醇剂量等培养条件与表达产量关系的分析,对重组蛋白的表达条件进行了优化。优化后的条件为:28~30 ℃,225 r/min振荡培养至BMGY中菌体OD600值为3.0~3.5时,将菌体转入相当于4倍体积BMGY,pH为6.0的BMMY培养基中培养72 h,每24 h加入甲醇至终浓度为总体积的0.5%~1.0%。在此优化条件下,重组蛋白的表达量可达275.38 μg/mL,比较温度对重组蛋白降解率的影响后发现,培养物上清液应保存于-20 ℃。
关键词:  巴斯德毕赤酵母  猪瘟病毒E2蛋白  A/D抗原区  表达条件  条件优化
DOI:
分类号:
基金项目:国家863高技术发展计划项目(2001AA249012)
Secretion expression conditions optimization of E2 protein A/D antigenic domain of hog cholera virus in Pichia pastoris
Abstract:
An option evaluation model on conglomerate M&A is given for those companies that have high uncertainty of future development perspective, by using a precise mathematical model.The result indicates that under several suitable parameters, the opportunity value of waiting to further invest after merging such a company is very large and makes it an important fact in M&A decision-making.
Key words:  Pichia pastoris  A/D antigenic domain  expression conditions  optimation